生物膜( BF) 能增加细菌对杀菌剂的抵抗性,它的形成能显著降低消毒剂的效果 。研究发现,消毒后的内镜中普遍存在细菌生物膜,内镜相关感染相当一部分原因就在于此,并且在临床实践中给操作人员带来很大困扰。本文采用大肠埃希菌悬液做菌群培养,采用Teflon管作为内镜试管, 使用常用的内镜清洗剂进行处理 , 并作对比研究 。将试验仪器形成密闭系统,取大肠埃希菌加入生理盐水,测试菌液浓度为0.5麦氏单位,加入灭菌营养汤混匀,保持温度37 ℃。随机纵向切开5 段生物膜测试管,在水浴中震荡,在PBS中稀释,培养一天之后,做细菌计数,并通过SEM进行观察。
使用推荐的内镜清洗剂,分为3组,包括含酶清洗剂组:四重酵素清洁剂、S copezim e、非含酶清洗剂组Intercept,浓度均为常用标准。每组随机取6段试管,先清洗浮游菌的生物膜,然后分别浸在3种清洗剂中,在室温下作用 3、5、7 min,用无菌PBS溶液洗去残余的清洗剂,空白对照组即制成功。
经过试验,两种含酶清洗剂组与非含酶清洗剂组对比差别明显,非含酶清洗剂组对生物膜细菌的清除效果较好,两种含酶清洗剂没有明显差别,通过观察,Teflon管腔内表面黏附细菌形成大量生物膜结构。经四重酵素清洁剂作用不同时间后, 管壁上仍可见细菌及生物膜黏丝样残留;经Scopezime作用不同时间后,细菌及生物膜细菌间胞外基质呈片状残留,而经Intercept作用不同时间后,Teflon管上有零星细菌及生物膜残留,且在三种作用时间下同种清洗剂的对比没有太大差别,因此我们认为3min的时间可以做为临床内镜清洗处理中操作时间标准,这可以大大提高效率和减小再感染的风险。
不同清洗剂作用3 min后分别与空白对照组进行了比较,清洗结果相差很大,说明含酶及非含酶清洗剂对生物膜细菌都具有一定的杀灭作用;只是非含酶清洗剂较含酶清洗剂对生物膜细菌的杀灭效果更胜一筹。经非含酶清洗剂Intercept处理后,Teflon 管内壁上的生物膜细菌几乎都被清除干净。
大肠埃希菌是肠道正常菌群的主要组成部分,是内镜清洗消毒后检测的主要污染的细菌,所以在试验中用大肠埃希菌作为培育生物膜的菌种具有一定的代表性。另外试验结果显示3种清洗剂清洗结果不同,处理后生物膜残留量不同,应该是含酶清洗剂Scopezime和四重酵素清洁剂对生物膜胞外基质有分解作用,二者在一定程度上能够去除生物膜,而非含酶清洗剂 Intercept 对能抑制细菌生长,并生物膜进行物理去除效果更好。